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          產(chǎn)品展示/ Product display

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          伴刀豆球蛋白A瓊脂糖凝膠

          伴刀豆球蛋白A瓊脂糖凝膠
          英文名稱:Con A Berpharose
          貨號(hào):B2781
          規(guī)格:5ml
          本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

          • 產(chǎn)品型號(hào):
          • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
          • 更新時(shí)間:2024-10-28
          • 訪  問  量:675
          立即咨詢

          聯(lián)系電話:13764793648

          詳細(xì)介紹

          伴刀豆球蛋白A瓊脂糖凝膠

          英文名稱:Con A Berpharose

          貨號(hào):B2781

          規(guī)格:5ml

          1.產(chǎn)品介紹

             伴刀豆球蛋白A-瓊脂糖凝膠是一種將伴刀豆球蛋白A(Con A)與鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質(zhì)。Con A是從巨豆中分離出來的一種植物血凝素,能與含有ɑ-D-吡喃甘露糖基、ɑ-D-吡喃葡萄糖基以及與其空間位置相關(guān)的分子基團(tuán)的結(jié)合。Con A與糖類分子結(jié)合主要在C-3、C-4及C-6的羥基部分,Con A與D-吡喃甘露糖的結(jié)合比與D-吡喃葡萄糖要強(qiáng)些,主要用于分離和純化一些糖蛋白、膜蛋白、糖脂、多糖、帶甘露糖苷或葡糖苷殘基的膜囊泡、lgM、激素脂蛋白等,例如人血清中胰蛋-白酶抑制劑、堿性磷酸酯酶、小牛脾磷酸二酯酶、不同變種的甲胎球蛋白和某些激素如絨毛膜促性-腺激素(HCG)、促黃體激素(LH)等物質(zhì)都可以用它純化。


          2.規(guī)格

          1ml(預(yù)裝柱)、5ml(預(yù)裝柱)、10ml(預(yù)裝柱)、20ml、100ml、500ml、1L 純化流程

          應(yīng)用舉例:


          平衡緩沖液:20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、pH7.4

          結(jié)合緩沖液:20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、pH7.4

          (該填料如需在 pH 小于5.0下操作,必須Mn2+和Ca2+的存在時(shí)才具有吸附活性)

          洗脫緩沖液: 20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、0.1M-0.2Mɑ-D-甲

          基甘露糖苷(或ɑ-D-甲基葡萄糖苷)、pH7.4

          (注:洗脫液中ɑ-D-甲基甘露糖苷或ɑ-D-甲基葡萄糖苷濃度可根據(jù)物質(zhì)吸附能力進(jìn)行線性或梯度洗脫。甘露糖和葡萄糖亦可以做洗脫物質(zhì),但洗脫能力較弱。結(jié)合能力較強(qiáng)的物質(zhì)可采用降低洗脫液pH洗脫,但不要低于pH4.0。可采用硼酸鹽作為洗脫液,如0.1M硼酸鹽,pH6.5。)

          平衡:用3-5個(gè)柱體積的平衡緩沖溶液進(jìn)行平衡,觀察檢測(cè)器的變化,直到電導(dǎo)率、  

                                 pH值等參數(shù)不變。

          上樣:樣品的預(yù)處理,樣品需至少用0.45μm濾膜過濾,在上樣,以免堵塞層析柱。

                                上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇,也可通過線性實(shí)驗(yàn)找到最佳

                                 上樣量。

          淋洗:用5-10個(gè)柱體積的平衡緩沖液進(jìn)行淋洗,觀察檢測(cè)器的變化,直到電導(dǎo)率、pH

                                值等參數(shù)基本不變。

          (4)洗脫:使用 5-10 倍柱體積的洗脫液,收集洗脫峰(部分洗脫方式需中和液中和)。

          (5)清洗保存:依次使用 3 倍柱體積的平衡緩沖液液和 5 倍柱體積的去離子水平衡填料,然后保存在等體積的20%乙醇中,置于 4-8 ℃保存。


          5.在位清洗(CIP):

          填料可以重復(fù)使用無需再生,但隨著非特異性結(jié)合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和結(jié)合載量都下降,這時(shí)可按照下面方法對(duì)樹脂進(jìn)行清洗。

          用 3-4 倍柱體積的含有0.5M NaCl的pH8.5或pH4.5的緩沖液清洗,然后立即用5倍柱體積的結(jié)合液平衡。

          去除結(jié)合力較強(qiáng)物質(zhì):用 2 倍柱體積的含1% Triton X-100,pH6.5的0.1M硼酸鹽緩沖液清洗,或20%乙醇或50%乙二醇溶液清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS,pH 7.4清洗。


          6.注意事項(xiàng):

          (1)使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響純化效果。

          (2)本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇,4-8℃。

          (3)運(yùn)輸:4-25℃,常,,避光。

          (4)僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。


          伴刀豆球蛋白A瓊脂糖凝膠

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