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          產(chǎn)品展示/ Product display

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          蛋白G瓊脂糖凝膠

          蛋白G瓊脂糖凝膠
          英文名稱:Protein G Berpharose FF
          貨號:B2777
          規(guī)格:1套
          本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

          • 產(chǎn)品型號:
          • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
          • 更新時間:2024-10-28
          • 訪  問  量:478
          立即咨詢

          聯(lián)系電話:13764793648

          詳細(xì)介紹

          蛋白G瓊脂糖凝膠


          英文名稱:Protein G Berpharose FF


          1.產(chǎn)品介紹


          鏈球菌G蛋白(Streptococcus Protein G,SPG)是G、C型鏈球菌細(xì)胞壁中的一種蛋白質(zhì),能特異性地同免疫球蛋白IgG分子的Fc段結(jié)合而不影響其Fab段與抗原分子結(jié)合的能力,其親和填料可以用于從血清、腹水、組織培養(yǎng)物等上清中結(jié)合吸附并純化免疫球蛋白(抗體)。


          2.規(guī)格


          1ml(預(yù)裝柱)、5ml(預(yù)裝柱)、10ml(預(yù)裝柱)、25ml、100ml、500ml、1L純化流程


          應(yīng)用舉例:


          結(jié)合緩沖液:20mM磷酸緩沖液、150mMNaCl、pH7.0


          洗脫緩沖液:0.1M甘-氨酸,PH3.0或0.1M檸檬酸緩沖液,pH 4.0


          中和緩沖液:1 M Tris-HCl,pH 8.5


          1) 1ml重組蛋白G瓊脂糖凝膠預(yù)填柱,用5-10個柱床體積的蒸餾水洗去保存液。


          2)用結(jié)合緩沖液平衡5-10個柱床體積。


          3)將5ml人多抗血清用結(jié)合緩沖液稀釋至50ml,0.45μm濾膜過濾上樣。


          4)用結(jié)合緩沖液平衡5-10個柱床體積至基線。


          5)用洗脫緩沖液洗脫抗體,收集洗脫峰,并用中和緩沖液調(diào)節(jié)其pH至中性。


          6)每次使用后依次使用3個柱體積的結(jié)合緩沖液,5個柱體積的去離子水,5個柱體積的20%的乙醇平衡保存,防止填料被細(xì)菌污染。


          7) SDS-PAGE電泳分析。


           6.注意事項(xiàng):


          1)樣品洗脫后一般pH很低,應(yīng)立刻用堿性中和緩沖液(如1MTris-HCl,pH8.5)將收集到的抗體溶液中和到中性,或在收集容器中事先裝5-10%、pH7.5的緩沖液(如1MTris-HCl或1M磷酸緩沖液),以利于維持抗體的生物活性,避免抗體失活。


          2)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響純化效果。


          3)填料再生清洗:隨著一些變性物質(zhì)的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和結(jié)合載量下降,嚴(yán)重影響純化效果,這時需要對填料進(jìn)行再生清洗(如下步驟)


          去除沉淀或變性物質(zhì):用2倍柱體積的6M鹽酸胍溶液進(jìn)行清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS, pH 7.4清洗。


          去除疏水性吸附造成的非特異性吸附物質(zhì):用3-4倍柱體積的70%乙醇或2倍柱體積的1% Triton™X-100清洗,然后然后立即用5倍柱體積的PBS, pH 7.4清洗


          4)本產(chǎn)品保存條件:20%乙醇,4~8℃。


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