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          β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)測定試劑盒的操作過程

          更新時間:2023-12-06      瀏覽次數(shù):463

          β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)測定試劑盒的操作過程

           測外源型 比色法)

          一、測定原理:

          β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidase,β-GD)作用于專一性底物釋放出游離的酚酞,用比色法測定游離

          酚酞的量表示酶的活力。

          二、試劑的組成和配制(50T/48 樣):

          試劑一:粉劑×3 支;臨用前每支粉劑中加入 1.0mL 試劑二(外源性),充分混勻后-20℃以下保存;

          試劑二(外源性):液體 15mL×1 瓶;4℃保存;

          試劑三:液體 100mL×1 瓶;4℃保存

          試劑四:1umol/mL 酚酞標準 1mL×1 支;4℃避光保存。

          三、操作過程:

          1、前處理:

          10%組織勻漿上清液的制備:準確稱取組織重量,按重量(g:體積(mL=1:9 的比例,加入 9 倍體積的

          生理鹽水,冰水浴條件下機械勻漿,2500 /分,離心 10 分鐘,取上清液進行

          測定。

          2. 操作表:

          四、計算公式及舉例:

          1、單位定義:每毫克組織蛋白在 37℃條件下,每分鐘能催化生成 1μmol 的酚酞的酶量就是 1 個酶活力單位。

          2、計算公式:

          五、測定意義:

          β-葡糖醛酸苷酶廣泛存在于機體組織中,除肝、脾、腎上腺外,胃腸道粘膜含量也較豐富,它具有水解

          固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖的生理功能。胃癌組織內此酶活力要顯著高于十二指腸潰瘍的胃組織,胃癌組織

          內此酶含量豐富,主要分布于癌細胞內;胃癌患者胃粘膜表面覆蓋著具有此酶強活力的膜狀物。這樣當含豐富

          酶的癌細胞破碎時,胞漿中此酶即進入胃液。測定胃液β-葡糖醛酸苷酶活力對于研究胃癌有重要的意義。

          β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)測定試劑盒的操作過程



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